Grundlagen
Die gemeinsamen Prinzipien aller chromatographischen Verfahren: wie sich Stoffe zwischen stationärer und mobiler Phase trennen und mit welchen Kenngrößen man eine Trennung beschreibt und auswertet.
Jede Chromatographie beruht auf demselben Grundgedanken. Eine mobile Phase transportiert ein Stoffgemisch über eine stationäre Phase, und jede Komponente verteilt sich in ihrem eigenen Verhältnis zwischen beiden. Was stärker an der stationären Phase haftet, wandert langsamer. Ob der Paracetamolgehalt einer Tablette per HPLC bestimmt oder eine Drogenprobe dünnschichtchromatographisch identifiziert wird, die Logik dahinter ist dieselbe.
Die Grundlagen bauen schrittweise aufeinander auf. Am Anfang stehen die Wechselwirkungen, die eine Trennung überhaupt erst möglich machen. Daraus folgt die Wahl von stationärer Phase und Fließmittel und damit die Reihenfolge, in der die Stoffe eluiert werden. Um eine Trennung zu beurteilen, braucht man Kenngrößen, die Retention, Selektivität, Effizienz und Auflösung sauber auseinanderhalten. Zuletzt geht es darum, das Chromatogramm selbst zu lesen: Peakform, Peakverbreiterung und die quantitative Auswertung.
Wer diese Begriffe sicher beherrscht, findet sie bei DC, HPLC, GC und Größenausschlusschromatographie in den folgenden Unterthemen wieder und ergänzt dort nur noch die Besonderheiten des jeweiligen Verfahrens.
Trennmechanismen
Wie Adsorption, Verteilung, Ionenaustausch und Größenausschluss Stoffe trennen und wie …
Chromatographische TrennprinzipienWie man Enantiomere trennt: direkt über eine chirale Umgebung im …
Direkte und indirekte EnantiomerentrennungChromatographische Phasen
Normal- und Umkehrphasenchromatographie unterscheiden sich darin, ob die stationäre oder …
Normalphasen und UmkehrphasenWie man aus den funktionellen Gruppen eines Moleküls ableitet, in …
Elutionsreihenfolge an Normal- und UmkehrphaseWie stark ein Lösungsmittel Analyte von Kieselgel verdrängt, wie man …
Fließmittel und eluotrope ReiheChromatographische Größen
Wie ein Chromatogramm aufgebaut ist, welche Strecken Gesamtretentionszeit, Totzeit und …
Chromatogramm, Retentionszeiten und Rf-WertRetentionsfaktor und Trennfaktor beschreiben, wie stark eine Säule einen Stoff …
Retentionsfaktor und TrennfaktorWie man aus Retentionszeit, Peakbreite und Säulenlänge die Trennstufenzahl N …
Trennstufenzahl und TrennstufenhöheWie man die Trennung zweier Peaks mit der Auflösung \(R_s\) …
Auflösung und Peak-Tal-VerhältnisDie Auflösungsgleichung zerlegt die Auflösung in Trennfaktor, Retentionsfaktor und Trennstufenzahl …
Einflussgrößen auf die AuflösungAuswertung von Chromatogrammen
Warum Substanzzonen in der Säule breiter werden und wie die …
Peakverbreiterung und van-Deemter-GleichungWie der Symmetriefaktor die Form eines Peaks beschreibt, warum basische …
Peaksymmetrie und TailingWie man aus einem Chromatogramm Identität und Menge eines Stoffes …
Qualitative und quantitative Auswertung